全自動定氮儀的原理以及特點
點擊次數:1925 發布時間:2017-08-01
蛋白質含量測定方法是生物化學研究中zui常用、zui基本的分析之一。目前常用的方法有全自動定氮儀法(Kjedahl、雙縮脲法(Biuret)、紫外吸收法、考馬斯亮藍法(Bradford)。其中Bradford法靈敏度zui高比紫外吸收法靈敏10~20倍Biuret法靈敏100倍以上。 凱氏定氮法雖然比較復雜但較準確往往以定氮法測定的蛋白質作為其他方法的標準蛋白質。
原理:自動定氮儀法測定蛋白質分為樣品消化、蒸餾、吸收和滴定4個過程。其原理是樣品中含氮有機化合物與濃在催化劑作用下共熱消化,含氮有機物分解產生氨,氨又與 — 作用,變成銨。然后加堿蒸餾 放出氨,氨用過量的硼溶液吸收,再用鹽標準溶液滴定求出總氮量換算為蛋白質含量。
特點:
凱氏定氮法是目前分析有機化合物含氮量常用的方法,是測定試樣中總有機氮zui準確和zui簡單的方法之一,被國內作為法定的標準檢驗方法。該凱氏定氮法適用范圍廣泛,用于標準蛋白質的準確測定,干擾少,干擾是非蛋白氮可用三乙沉淀蛋白質而分離測定結果準確,重現性好,但操作復雜費時,試劑消耗量大。費時太長,通常8-10個小時,靈敏度低,測定范圍是0.2-1.0mg。
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